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線粒體DNA提取試劑盒使用過程中注意事項

更新時間:2021-03-01  |  點擊率:4070
   線粒體DNA提取試劑盒產品說明:
  線粒體DNA提取的關鍵是盡可能的去掉核DNA。利用差速離心到比較純凈的線粒體,再利用DNA酶消化裂解緩沖系統(tǒng)等多步驟去掉核DNA,后得到純凈的線粒體DNA??捎糜赑CR等對純度要求較高的實驗。
  本試劑盒用于從動物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養(yǎng)細胞線粒體DNA的提取制備。不適合植物及其他標本的提取。
 
  在使用線粒體DNA提取試劑盒注意事項:
  1.為保證獲得完整及盡可能多的線粒體,勻漿條件要示:一是全程低溫操作。二是快速。三是如用條件可將勻漿后的碎片在顯微鏡下觀察。與組織塊相比,培養(yǎng)細胞特別是貼壁培養(yǎng)細胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁,因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴密的研杵上下研磨培養(yǎng)細胞。
  2.線粒體DNA本身含量很低,如果電泳檢測不到,可加大上樣量,用更少量的TE溶解沉淀,或者直接進入PCR檢測。