梯度降溫凍存盒在恢復(fù)室溫的操作方法
更新時間:2023-05-24 | 點擊率:3407
梯度降溫凍存盒是一種用于保存生物樣本的容器,在進行快速冷凍凍存后,需要采取適當(dāng)措施以使樣本在恢復(fù)到室溫時不受損害。它能夠?qū)悠房焖俚亟禍氐降蜏貭顟B(tài),從而有效地延長樣品的保存時間。
下面是操作方法:
1.取出凍存盒:將凍存盒從液氮罐中取出,放置于室溫下的平坦表面上。
2.開啟蓋子:打開盒蓋,并迅速將樣本轉(zhuǎn)移到預(yù)先準備好的接受樣本的容器中。如果樣本數(shù)量眾多,可以使用專門的樣本細胞解凍架,方便快捷。
3.漸進恢復(fù)溫度:在室溫下將容器中的樣本緩慢升溫至4℃,這個過程需要盡可能的緩慢,時間要求約為30分鐘左右。
4.洗滌:在緩慢升溫的同時,可以進行一定的洗滌過程,以去除掉DNase、RNase等雜質(zhì)或污染。
5.細胞培養(yǎng)基底液:在恢復(fù)溫度后,可以選擇加入適量的細胞培養(yǎng)基底液進行培養(yǎng)以修復(fù)凍存造成的細胞損傷,具體添加量可以根據(jù)樣本的情況而定。
6.培養(yǎng)條件:經(jīng)過緩慢升溫和培養(yǎng)基底液的加入后,可將樣本置于恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。注意要控制好培養(yǎng)條件,如CO2濃度、濕度等。
總之,使用梯度降溫凍存盒保存生物樣本是一種常見的方法。在快速冷凍過程中,應(yīng)盡可能減少樣本受損害的風(fēng)險,并且在恢復(fù)到室溫時采取適當(dāng)?shù)臐u進恢復(fù)溫度的操作方法,以確保凍存樣本的完整性和穩(wěn)定性。