全蛋白提取試劑盒（中）

描述：全蛋白提取試劑盒（中）
貨號：BC3711
價格：600.00元
規(guī)格：50T 100T

更新時間：2023-08-31

產(chǎn)品型號：BC3711

所在城市：上海市

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：1664

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產(chǎn)品簡介

儲存條件	-20℃，避光，有效期至少1年
規(guī)格	50T 100T
單位	盒

全蛋白提取試劑盒（中）用于哺乳動物組織和細(xì)胞中提取總蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑，作用較為溫和，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產(chǎn)品組成:

	規(guī)格	儲存條件
裂解液（中）	100 ml	2-8^oC
磷酸酶抑制劑（100x）	1ml	-20^oC
蛋白酶抑制劑（100x）	1 ml
PMSF（100x）	1ml

操作方法:

1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；
稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；
將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清至新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解；

備注：以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.