具體信息如下

應(yīng)用

FuGENE ^® HD轉(zhuǎn)染試劑，是下一代的轉(zhuǎn)染試劑，動(dòng)物源性成分。它的設(shè)計(jì)包括昆蟲(chóng)細(xì)胞和許多細(xì)胞線(xiàn)未轉(zhuǎn)由其他試劑（如。，MCF-7，HeLa細(xì)胞的RAW 264.7，PC-3，MA-10，肝癌，SH-SY5Y細(xì)胞轉(zhuǎn)染的真核細(xì)胞中廣泛A7r5，STO，SCC-61，STSAR-90，SQ20B，T98）。

 

 

好處

• 產(chǎn)生有意義的生理結(jié)果，由于FuGENE ^® HD轉(zhuǎn)染試劑具有低毒性，并沒(méi)有“觸電”細(xì)胞（圖1）。

 

圖1： 使用兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)條件下的轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效率的比較之后，他們用一個(gè)質(zhì)粒攜帶LacZ基因轉(zhuǎn)染，細(xì)胞培養(yǎng)一個(gè)額外的24小時(shí)。設(shè)置從羅氏與β-半乳糖苷酶染色檢測(cè)β-半乳糖苷酶的表達(dá)。

 

 

 

• 防止細(xì)胞的損失， 因?yàn)镕uGENE ^® HD轉(zhuǎn)染試劑的有效運(yùn)作（圖1）在標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)媒體和那些包含多達(dá)100％的血清（圖2），消除了媒體變化的需要（轉(zhuǎn)之前或之后）。

圖2： 標(biāo)準(zhǔn)生長(zhǎng)介質(zhì)中存在較高的血藥濃度有兩個(gè)轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效率的比較是由100％FBS轉(zhuǎn)染前1小時(shí)更換。與質(zhì)粒攜帶的LacZ基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，他們被培養(yǎng)為一個(gè)額外的72小時(shí)。設(shè)置   從羅氏與β-半乳糖苷酶染色檢測(cè)β-半乳糖苷酶的表達(dá)。

• 提供一個(gè)很好的模型系統(tǒng)，為模仿生物的條件，因?yàn)镕uGENE ^® HD轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染高（可達(dá)100％）血清中的細(xì)胞。

 

 

 

• 節(jié)省時(shí)間和減少錯(cuò)誤，因?yàn)檗D(zhuǎn)染程序 FuGENE ^® HD轉(zhuǎn)染試劑很少采取的步驟（圖3），不需要定制不同類(lèi)型的細(xì)胞。

圖3： 轉(zhuǎn)染過(guò)程 FuGENE ^® HD轉(zhuǎn)染試劑  ，請(qǐng)注意該程序不需要媒體變化后第2步。

 

 

 

• 生成的蛋白質(zhì)表達(dá)水平高，在眾多的追隨者和懸浮適應(yīng)的真核細(xì)胞系，包括HEK-293（圖4a），Hep G2細(xì)胞，CHO-S的CHO - K，COS-7，COS-1，和昆蟲(chóng)細(xì)胞株高五（圖4b）和昆蟲(chóng)。 

 

圖4a：高懸浮適應(yīng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率和蛋白的表達(dá)。
小組：的HEK-293 EBNA細(xì)胞懸浮適應(yīng)與質(zhì)粒DNA表達(dá)GFP轉(zhuǎn)。轉(zhuǎn)染試劑/ DNA比值為7:2，6:2，5:2，4:2，3:2。B組：轉(zhuǎn)染細(xì)胞的比例確定轉(zhuǎn)染后28小時(shí)，綠色熒光蛋白的數(shù)量估計(jì)在考馬斯染色凝膠蛋白在轉(zhuǎn)染后72小時(shí)。*估計(jì)產(chǎn)量

 

圖4b： 高轉(zhuǎn)染效率和高五昆蟲(chóng)細(xì)胞中蛋白表達(dá)的
小組：含有LacZ基因的載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞。轉(zhuǎn)染效率轉(zhuǎn)染后24小時(shí)組織化學(xué)染色表明，β-半乳糖苷酶的活性（β-gal 染色集）小組B：表達(dá)人類(lèi)激酶Akt1與MKK6載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞。細(xì)胞裂解液中的蛋白表達(dá)，Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后72小時(shí)內(nèi)。

 

 

 

 

• 簡(jiǎn)化下游蛋白質(zhì)純化，因?yàn)榕cFuGENE ^® HD轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染，往往會(huì)產(chǎn)生高表達(dá)的蛋白水平。
• 生產(chǎn)速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)桿狀病毒細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)在昆蟲(chóng)細(xì)胞中的蛋白質(zhì)，  蛋白質(zhì)生成與FuGENE ^® HD轉(zhuǎn)染試劑啟動(dòng)的程序，可以采取比baclovirus系統(tǒng)（圖5）少18天（從轉(zhuǎn)染蛋白質(zhì)純化）。

   

圖5： 比較傳統(tǒng)的桿狀病毒細(xì)胞表達(dá)方式，表達(dá)系統(tǒng)，使用FuGENE ^® HD轉(zhuǎn)染試劑。

 

 

產(chǎn)品描述

成分： *和專(zhuān)有的混合在80％乙醇，許多組件。

存儲(chǔ)：   穩(wěn)定在+2°C至+8°C。

穩(wěn)定性：  2年，從生產(chǎn)之日起開(kāi)始。

 

內(nèi)容

80％的乙醇溶液，過(guò)濾消毒（0.1微米）過(guò)濾器，在透明的玻璃小瓶包裝。

 

質(zhì)量

很多具體分析： 
每個(gè)FuGENE很多仔細(xì)的檢查，使用ISO DIN 9001認(rèn)證的程序，以確保產(chǎn)品按規(guī)范執(zhí)行是*的從很多很多。

功能分析：
轉(zhuǎn)染COS 7細(xì)胞的96孔板報(bào)告基因的載體DNA，0.3μLFuGENE ^® HD和0.1微克的DNA或0.25μLFuGENE ^® HD和0.1微克的DNA。通過(guò)對(duì)參考很多比色法測(cè)試報(bào)告基因活性的監(jiān)測(cè)。活動(dòng)必須≥75％相比，參考很多在測(cè)試上面列出的金額，至少之一。

細(xì)胞毒性分析：
使用細(xì)胞生長(zhǎng)評(píng)估分析   這是一種間接測(cè)量的細(xì)胞毒性。其余細(xì)胞功能分析的可行性測(cè)試。